产品简介
Baobiotrans-2 DNA transfection reagent 适用于多种常见贴壁细胞，能够完成质粒 DNA, si RNA及其它形式DNA,RNA,寡核苷酸片段等高效转染,也可用于基因治疗及体内转染等，已在HEK293,293T，NIH3T3，Marcl45，HCT116，VERO，Hela，Cos-7，L929，RAW 264.7等多种细胞得到验证。该产品在Baobiotrans-1的基础上升级，经过精心设计，使其具备优质的转染性能以及转染到细胞核内的快速释放能力，操作简单，可重复性强。其转染性能优于进口试剂，具有低毒、高效、稳定，重复性高的转染特点。
注意事项（本转染试剂仅用于科研）
1. 制备脂质体-DNA复合物时，最佳在无血清状态下结合/稀释；但在血清和抗生素状态下不受二者影响，完成正常转染。
2. 细胞密度，活率严重影响转染效果，保持细胞汇合度70-85%为最佳。
3. 细胞转染过程须轻柔，严禁涡旋振荡。
4. 使用高纯度，无菌，无内毒素，蛋白残留的DNA，可明显提高转染效率。
Baobiotrans-2 测试效果
对标进口品牌系列产品，分别在 293T, COS-7, Marc145 以及 Vero 等细胞系水平进行质粒 DNA 转染测试， 24 h 观察其转染效果，具体表现如下：
图为转染 24 h 后不同细胞系 10 x 倍镜下的荧光效果图
具体操作步骤
1. 质粒DNA转染(以24孔细胞培养板为例)
1) 转染前24 h对细胞进行传代，接种密度0.5-2x10cel1s/wel1:待细胞汇合度70-85%左右进行转染。
2) 准备a，b两管，于两管中分别加入Opti-MEM25ul，向a管中加入1uLl的脂质体转染试剂;b管中加入0.5ug的质粒DNA，然后将a管液体全部移入b管，室温孵育15-20min。
3) 孵育完成后，将脂质体- DNA复合物滴入培养板中，再补足相应的Opti-MEM用量即可，转染过程4-6h内即可完成，18-24h之后可观察转染荧光效果。
备注：若使用Opti-MEM培养基整个转染过程不需要换液;若使用无血清培养液，则转染6h左右，及时更换成完全培养基。(一般推荐转染试剂：DNA为2(uL):1(ug)的用量:若进一步提高转染效率，可提高转染试剂和DNA用量，即转染试剂(uL):DNA用量(ug)=2~5:1。)
不同培养转染体系推荐用量如下：
| 培养器皿 | 表面积(cm²) | DNA 用量（ug） | 转染试剂用量（uL） | 稀释液体积（uL） | 培养基用量（mL） |
| 96 well | 0.3 | 0.1 | 0.1 | 10 | 0.1 |
| 48 well | 0.7 | 0.2 | 0.3 | 20 | 0.2 |
| 24 well | 1.9 | 0.5 | 1 | 50 | 0.5 |
| 12 well | 3.8 | 1 | 2 | 50 | 1 |
| 6 well | 10 | 2 | 4 | 100 | 2 |
| 25cm² Flask | 21 | 4 | 8 | 200 | 4 |
| 75cm² Flask | 58 | 10 | 20 | 500 | 10 |
2. siRNA的转染(以6孔细胞培养板为例)
1)转染前24 h对细胞进行传代，接种密度0.5-2x105 ce11s/we11;待细胞汇合度70-85%左右进行转染。
2)转染前将6孔板内换成2L新鲜培养液，使细胞维持在一个最佳的状态；
3)准备干净离心管，加入120ul无抗生素和血清的DMEM或opti-MEM medium，然后加入100 pmol si RNA，吸头轻轻混匀，再加入4ul转染试剂，再次吸头混匀，于超净台内室温孵育20min左右；孵育结束后全部均匀滴加至6孔板内继续培养即可(中途不需要换液)。
备注：si RNA的一般用量10-60 u；通常si RNA(pmol)与Baobiotrans-2(uL)的最佳比例保持在2.5:1；根据不同的细胞类型，可进行相应的调整。
不同培养转染体系推荐用量如下：
| 相应组分 | 96 well | 48 well | 24 well | 12 well | 6 well |
| 无血清培养液或 Opti-MEM Medium | 5 uL | 10 uL | 20 uL | 50 uL | 120 uL |
| si RNA | 4 pmol | 10 pmol | 20 pmol | 40 pmol | 100 pmol |
| Baobiotrans-2 转染试剂 | 0.18 uL | 0.5 uL | 0.8 uL | 1.5 uL | 4 uL |
