产品描述
类器官消化液是一种无血清试剂,专为常规传代培养源自多种哺乳动物(如人、小鼠、猪、蝙蝠和牛)的类器官而设计。该溶液能温和地将类器官从基质胶中分离,并将其消化成小细胞团或单细胞,同时保持传代后的生长活力。
使用说明
注:本产品仅供研究使用。
使用方案:
1. 向回收的类器官中加入5-10倍体积的类器官消化液。轻柔吹打混匀后,置于37℃孵育1-8min以促进类器官消化(需将所需体积的消化液预温至37℃;单层类器官消化时间为0.5-3min,多层或较大类器官解离时间为3-8min)。
注:请仔细监测消化过程,避免过度消化。消化过程中可使用移液器混合以辅助消化。取少量消化混合物进行显微观察。当观察到大量直径小于50uM的单细胞或细胞团时,即视为消化完成。
2. 消化完成后,加入至少五倍体积的类器官培养基以稀释溶液并终止消化过程。
注:若消化时间较长,可添加胎牛血清(FBS)至终浓度2%-5%,以确保消化后细胞活性。
3. 将上一步获得的类器官悬浮液离心(使用水平转子以150-300 g离心3min),弃去上清液,并将类器官沉淀重悬于新鲜培养基中。
4. 将重悬后的类器官溶液再次离心,弃去上清液,所得类器官即可用于后续培养、冻存或其他实验操作。
