产品简介
产品核心基础为DMEM高糖培养基,并已按最佳比例添加了经过RAW264.7筛选反复验证过的胎牛血清(FBS)、青霉素一链霉素(双抗)、GlutaMAX。所有成分均经过严格筛选和质量控制,无需添加任何其他成分,开瓶即可使用,能有效支持RAW264.7细胞的增殖,维持其良好的细胞形态及正常的巨噬细胞功能特性。本产品仅供科研使用,不得用于诊断、治疗、临床、家庭及其它用途。
使用说明
1. 培养基预热:使用前,请将培养基提前从4°C冰箱取出,置于室温或37°C水浴中预热。避免长时间置于高温环境中,以防成分失活。
2. 细胞传代:RAW 264.7细胞严禁使用胰酶消化,因为胰酶会刺激细胞发生分化,改变其生理状态。
推荐传代方法:
a. 吸弃培养瓶中的旧培养基。
b. 向瓶内加入适量新鲜预热的完全培养基(约2-3mL/T25瓶)。
c. 直接用无菌细胞刮刀刮落贴壁细胞(往同个方向刮),或无菌的巴氏吸管反复轻柔吹打,使细胞脱落并分散成单细胞悬液。
d. 添加培养基制合适体积(T25加 5ml、T75加10ml),按1:3-1:4传代。
e. 放入37°C、5%CO2培养箱中继续培养。
质量控制
| 无菌试验(细菌、真菌) | 阴性 |
| 支原体检测 | 阴性 |
| 内毒素含量 | ≤0.015 EU/mL |
| 细胞生长实验 | 细胞生长良好,形态正常 |
注意事项
1. 无菌操作:所有操作应在无菌环境下进行,避免微生物污染。
2. 禁止胰酶:再次强调,切勿使用胰酶消化RAW 264.7细胞,以免诱导其分化。
3. 及时传代:细胞密度达到80%-90%时需及时传代。过度生长会导致细胞自发分化。
4. 形态观察:RAW 264.7细胞呈规则圆形或椭圆形,半贴壁生长。培养过程中出现极少量分化细胞(梭形)属正常现象。根据贴壁松紧差异,可将未分化的细胞吹下,并转移至新的培养器皿中进行培养。细胞密度高时,会有少量细胞脱落漂浮,这些细胞通常仍有活力,传代时应收集起来离心后重悬传代。
5. 减少刺激:应尽量避免离心和温差冲击以降低细胞分化概率。
6. 产品保存:请于有效期内使用。开封后若久置,建议瓶口密封并冷藏,且尽快用完。如发现培养基浑浊、沉淀或颜色异常,应停止使用。
