产品简介
DMEM/F12 (Oulbecco's Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F12)是广泛使用的支持多种哺乳动物细胞生长的基础培养基。本产品是 DMEM培养基和 Ham’sF12 培养基的1:1 混合物,是在低血清条件下培养多种细胞类型的理想产品。Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)是改良的Eagle基本培养基(BME),氨基酸和维生素浓度是BME的四倍。Ham'sF12 以 Ham's F10 培养基为基础,显著提高了胆碱、肌醇、腐胺和几种氨基酸的浓度。
产品特点
1. 适用于MDCK,神经胶质细胞,成纤维细胞,人内皮细胞和大鼠的成纤维细胞的培养。
2. DMEM/F12是 DMEM和Ham's F12的1:1 混合物,结合了 DMEM 的高浓度的糖、氨基酸、维生素和F12的多种营养成分。DMEM/F12不含蛋白质、脂类或生长因子。因此培养时需要添加更多的营养物质,低血清培养时需加ITS等,常规培养需添加10%胎牛血清。
3. 本品种含 L-谷氨酰胺、丙酮酸钠,不含 HEPES、酚红。
使用说明
1. 准备工作:将 DMEM液体培养基、血清和抗生素放到室温平衡 30min。
2. 配制:按照实验需求,将DMEW/F12液体培养基、血清和抗生素按一定比例混合。通常,向DMEW/F12液体培养基中加入10%的血清和1%的抗生素。
3. 无菌操作:在无菌操作台中进行以下步骤,确保所有操作均符合无菌要求。
4. 细胞接种:将需要培养的细胞从原培养容器中取出,用适当的培养基或PBS 清洗后,接种到含有 DMEM/F12液体培养基的培养瓶或培养皿中。细胞接种密度应根据细胞类型和实验需求确定。
5. 培养:将接种了细胞的培养瓶或培养皿放入37°C、5%CO2 的细胞培养箱中进行培养。根据细胞生长情况,定期观察并更换培养液。
注意事项
1. 无菌操作:在整个使用过程中,务必保持无菌操作,避免微生物污染。
2. 血清来源:尽量使用同一家供应商提供的血清,以减少细胞间的差异。同时,血清应在保质期内使用,避免过期导致细胞生长不良。
3. 储存条件:DMEM/F12液体培养基应保存在2~8°C,避免高温和阳光直射。
4. 补加试剂时,应按照包装袋说明进行添加。
