产品简介
RIPA裂解液（RIPA Lysis Buffer）是一种传统的细胞及组织快速裂解液。RIPA裂解液有很多配方，按其裂解效果主要分为强，中，弱三种。RIPA强裂解液裂解组织、细胞得到的蛋白样品可以用于常规的PAGE、Western等对蛋白活性没有严格要求的实验。本产品主要成分包含50 Tris-HIC1(pH7.4)，150mM NaC1，1 mM EDTA，1%Triton X-100，1%脱氧胆酸钠及0.1%SDS。本产品适用于动物或植物组织及细胞样品，也可用于真菌或细菌样品。
使用说明
自备蛋白酶抑制剂。RIPA裂解液（弱）在临用前需加入蛋白酶抑制剂，防止蛋白降解。以下使用方法中提到的 RIPA裂解液（弱）均指已添加蛋白酶抑制剂。
对于组织样品：
1. 组织块用预冷PBS洗涤，去除血污，剪成细小碎块置于匀浆器中。
2. 加入10倍组织体积RIPA裂解液（弱）低温匀浆。注意：RIPA裂解液（弱）的使用量可按照约每50mg组织与1裂解液的比例添加。如组织蛋白含量较低，可降低裂解液的用量，以提高粗提溶液中的蛋白浓度。
3. 将匀浆 液转移至1.5m离心管中，振荡。冰浴30min，期间每10min用移液器反复吹打，确保组织细胞完全裂解:
4. 12000g离心5min，收集上清，即为总蛋白溶液。
对于贴壁细胞样品：
1. 用 PBS清洗细胞2-3次，最后一次彻底吸干残留液。
2. 按照6孔板每孔细胞250uL 裂解液的比例吸取RIPA裂解液（弱）于细胞培养板、瓶内，反复晃动培养板、瓶，使裂解液与细胞充分接触3-5min。
3. 用细胞刮刀将细胞刮下，收集到离心管中。
4. 冰上裂解30 min。
5. 12000 g离心5min，收集上清，即为总蛋白溶液。
对于悬浮细胞样品：
1. 离心收集细胞。
2.按照6孔板每孔细胞250uL裂解液的比例将细胞液与RIPA裂解液（弱）混合，振荡。
3.冰浴30min，期间每10min用移液器反复吹打数次，确保细胞完全裂解。
4.12000 g离心5min，收集上清，即为总蛋白溶液。
对于细菌或真菌样本：
1. 取1m菌悬液，离心去上清，PBS洗涤一次，充分去除液体。涡旋使菌体尽量分散。
2. 加入100-200 uLRIPA裂解液（弱），轻轻涡旋使菌体与裂解液充分混匀。
3. 冰浴10min，期间每2min用移液器反复吹打数次，确保菌体完全裂解。
4. 12000 g离心5min，收集上清，即为总蛋白溶液。
注意事项
1. 组织或细胞裂解时可能会出现粘稠状。可用移液器反复吹打或涡旋仪振荡，直至呈液状为止。如果一直较稠，可再加入适量裂解液。
2. 本试剂不含有蛋白酶抑制剂，需自备蛋白酶抑制剂并在临用前加入。
3. 操作时请穿实验服，并佩戴一次性手套。
