产品简介
本产品是用于 Western Blot 湿转法的快速湿转液，在传统 WB 的转膜液的基础上进行了改良，能在 400mA恒流 10-30 分钟快速完成将蛋白转至 NC 膜或 PVDF 膜上，较传统的湿转液相比产热低，无需冰浴，具有快速优良的转膜效果，且本产品最终配制用无水乙醇代替甲醇，安全无害。本产品没有添加无水乙醇，需自行添加。
使用说明
1. 若需要配制 1×WB 免降温快速湿转液，准备一个洁净的容器，倒入 100mL WB 免降温快速湿转液（10×）后加入 500mL 蒸馏水或超纯水，再加 200mL 无水乙醇，最后加入蒸馏水或超纯水定容至 1L 可得到 1000ml 1 ×WB 免降温快速湿转液，即可使用。
2. 将 NC 膜、PVDF 膜（需用甲醇或者乙醇先激活膜 60-90 秒钟）浸泡在缓冲液中。
3. 将转印所需的物品以负极为底（一般为黑色）按照海绵，支撑纸，跑完电泳的 PAGE 凝胶，转印膜，支撑纸，海绵的顺序依次摆放，根据摆放的凝胶位置用圆珠笔在转印膜上标注孔位，然后转移至电泳槽中（插入装置时保证转印膜朝向转印槽正极）注意摆放过程中不要出现气泡，避免影响蛋白从 PAGE 胶上转印到膜上。倒入 1×WB 免降温快速湿转液，湿转液要没过转印膜。将电泳槽设置 400mA 恒流，电泳 15-30 分钟即可（针对 1.0mm 厚的凝胶，若 0.75mm 厚适当减少时间，1.5mm 厚适当增加时间），同时根据蛋白大小调整电泳时间。
| 恒流 | 蛋白大小 | 电泳时间 |
300mA | 20kDa 以下 | 20 分钟 |
| 20-100kDa | 30 分钟 | |
| 100-200kDa | 45 分钟 | |
| 200kDa 以上 | 60 分钟 | |
400mA | 20kDa 以下 | 15 分钟 |
| 20-100kDa | 25 分钟 | |
| 100-200kDa | 35 分钟 | |
| 200kDa 以上 | 45 分钟 |
注意事项
1．用时注意 1×WB 免降温快速湿转液尽量全部没过转印膜，避免部分没有浸润在转膜液内的蛋白转膜效果受影响。
2．若出现沉淀情况，请将 WB 免降温快速湿转液（10×）恢复室温，直至无沉淀。
3．PVDF 膜在使用前需要浸泡在无水乙醇 30s-60s 以激活。
4．若室内气温高，建议转膜时间超过 45 分钟时进行冰浴。
5．本产品配制成 1×WB 免降温快速湿转液后建议使用 2-3 次。本产品为无色透明液体，若产品颜色变为棕黄 色，即时丢弃，避免影响转膜效果。
6．为了您的安全与健康，请穿实验服并带一次性手套操作。
