产品简介
无酶细胞消化液不含蛋白消化酶,但能使贴壁细胞与培养瓶皿表面有效脱离达到分离细胞的目的。与常规胰蛋白酶消化方法相比,无酶细胞消化液作用温和,不损伤和破坏细胞,不影响细胞生物学特性,是肿瘤细胞在体移植实验的最佳细胞脱壁方法。细胞用无酶消化液脱壁后,可直接进行传代培养或离心收集用于其它实验。由于未使用蛋白酶制剂,因此特别适于收集细胞进行核蛋白和胞浆蛋白制备、Western B1ot、免疫共沉淀实验,同时能避免样品蛋白降解,并避免蛋白酶制剂中的 RNA酶对 RNA的降解。
产品特点
1. 室温孵育10分钟,贴壁细胞即可从瓶皿脱落,温和而有效。
2. 脱壁的细胞可用于连续传代。
3. 培养肿瘤细胞进行在体移植实验的最佳消化方法。
4. 避免蛋白酶过度消化细胞及降解样品蛋白。
5. 制备胞核和胞浆蛋白、进行WesternBlot、免疫共沉淀。
6. 避免蛋白酶制剂中污染的 RNA酶降解 RNA。
7. 本品种含EDTA,不含胰酶。
使用说明
1. 用 PBS洗涤单层培养细胞,尽可能完全去除瓶中液体。
2. 加入适量无酶细胞消化液使其覆盖细胞表面,晃动瓶皿,使所有细胞均充分接触无酶消化液。
3. 室温放置10分钟或适宜时间,偶尔晃动瓶皿,直到细胞完全脱壁。可加入细胞培养基或2-3倍体积PBS缓冲液终止反应。脱壁后可能有成片细胞连在一起的现象,属于正常,如用作肿瘤移植,上述情况的产生可利于肿瘤细胞的生长。37°C时脱壁反应会加速。
4. 500g离心5-10分钟,弃上清,收集细胞。
5. 收集的细胞可用于:(1)胞核胞浆蛋白制备:(2)Western blot:(3)免疫沉淀实验:DNA-4蛋白结合实验;(5)RNA提取:(6)分瓶传代。
注意事项
1. 尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2. 在使用细胞消化液的过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
3. 细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
