产品简介
吖啶橙 (AO)：具有全膜通透性，可自由穿透活细胞和死细胞的细胞膜与 DNA 结合时发出绿色荧光(激发 488nm，发射 525-530nm)与 RNA 结合时发出橙红色荧光(激发 488nm，发射> 600nm)。碘化丙啶 (PI)：非膜通透性，只能进入细胞膜受损的细胞与 DNA 结合后发出红色荧光(激发 535nm，发射 617nm)，无法穿透活细胞的完整细胞膜，因此仅标记死细胞。活细胞因膜完整，只能被 AO 染色→绿色荧光；死细胞因膜破损，同时被 AO 和 PI 染色→红色荧光；PI 通过荧光共振能量转移 (FRET)抑制 AO 的绿色荧光，增强自身红色信号。
使用说明
1. 悬浮细胞染色
（1）收集样本细胞，细胞数量在 2-10×105 个以内。
（2）用 PBS 洗涤细胞两次。
（3）细胞染色：取清洗过的细胞和染色液按1:1体积混合。
（4）轻轻混匀后避光孵育5～10 分钟。
（5）用荧光显微镜、荧光细胞计数仪或流式细胞仪检测结果
2. 贴壁细胞原位染色
（1）用 PBS 洗涤细胞两次。
（2）用PBS和染色液按1:1体积混合。
（3）将混合后染液加到细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积。
（4）37℃孵育细胞 5～10 分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用5 分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。（若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。）
（5）吸干染色工作液，用培养基洗培养板或盖玻片 2～3 次，每次用预热的培养基覆盖所有细胞，然后吸干培养基。
3. 结果分析：
（1）在荧光显微镜下，选用 488nm 激发光镜检：
（2）AO 染色正常细胞 DNA ，活细胞呈黄绿色荧光，形态结构正常。
（3）当细胞凋亡或死亡时，PI能进入死细胞，被染成大小不一、致密浓染，死细胞发出红色荧光。
注意事项
1. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗。
2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
